Comment utiliser une pipette

Comment utiliser une Pipette ?

Êtes-vous contrarié par l'imprécision des résultats obtenus avec une pipette ?

Apprenez à utiliser correctement une pipette et améliorez vos résultats instantanément :

1. Assurez la stabilité de la température : Assurez-vous que la pipette, les embouts et les liquides sont à température ambiante (si l'expérience le permet).
2. Maintenir un angle de pipette constant : Tenez la pipette à un angle constant ne dépassant pas 20 degrés.
3. Comment aspirer : Aspirer en immergeant les pointes juste en dessous de la surface du liquide (2-3 mm).
4. Méthodes pour retirer la pipette du récipient : Après une distribution, utilisez l'une des 3 méthodes suivantes pour retirer la pipette du récipient cible.
5. Pré-humidification : Pré-humidifiez en aspirant et en distribuant le volume nominal 3 fois.
6. Optimiser la plage de volume d'aspiration : Pipeter dans la plage de volume optimale (35-100 % du volume nominal pour les pipettes à déplacement d'air).
7. Jeter la première et la dernière distribution : Lors de la distribution de plusieurs aliquotes, il est recommandé de jeter la première et la dernière distribution de la série.
8. Pipetage de liquides visqueux : Pipeter les liquides visqueux à des vitesses plus lentes et en mode "Pipetage inverse".
9. Pipetage de liquides volatils : Pipeter des liquides volatils rapidement et en mode "Pipetage inverse".
10. Calibrez en fonction de la densité du liquide : Recalibrez votre pipette si le liquide a une densité considérablement différente de celle de l'eau.

Avant de commencer :

1. Assurez l'équilibre de la température

La pipette, les pointes et les liquides doivent être équilibrés à température ambiante si l'expérience le permet.

Remarque : les différences de température entraînent une contraction ou une expansion du volume du coussin d'air à l'intérieur de la pointe et de la pipette, ce qui peut avoir un impact négatif sur l'exactitude et la précision de la dépose.

Comment pipeter

2. Maintenir un angle de pipette constant

Dans la mesure du possible, tenez la pipette à un angle constant tout au long du processus de pipetage. L'angle ne doit pas dépasser 20 degrés.

Remarque : En changeant d'angle, la pression hydrostatique à l'intérieur de la pointe varie. Par conséquent, le volume d'aspiration sera irrégulier.

3. Comment aspirer

Il est préférable d'immerger les pointes de pipettes juste en dessous de la surface du liquide (2-3 mm) pour permettre l'aspiration du volume désiré. Une immersion trop profonde de la pointe de la pipette augmente le risque que des gouttelettes de liquide s'accrochent à l'extérieur de la pointe de la pipette.

Remarque : Le liquide retenu à l'extérieur de la pointe peut entraîner une distribution inexacte.

4. Retirer la pipette du récipient

Après une distribution, utilisez l'une des 3 méthodes suivantes pour retirer la pipette du récipient cible.

• Retirez la pointe de la pipette en faisant glisser l'extrémité de la pointe le long de la paroi latérale du récipient. Cette méthode est recommandée pour obtenir la dépose la plus précise.

Toucher la surface

• Si la distribution a été faite directement dans le liquide, elle est considérée comme une distribution par voie humide et une retouche n'est pas nécessaire. Idéal pour la distribution de petits volumes afin de s'assurer que le liquide ne reste pas sur le côté du récipient.

Remarque : après une distribution, le liquide résiduel reste souvent accroché à l'extrémité de l'aiguille. Les techniques ci-dessus permettent d'éliminer ce liquide résiduel de la pointe.

Optimisation des performances de pipetage

5.Pré-humidification

Après avoir chargé de liquide les pointes sur votre pipette, aspirez et distribuez le volume nominal 3 fois. Cela permettra d'équilibrer les différences de température et d'humidifier l'espace d'air mort à l'intérieur de la pipette et de la pointe. En négligeant la procédure de pré-humidification (pré-mouillage), les premières distributions ont tendance à délivrer un volume moindre en raison de l'évaporation.

Remarque : L'évaporation peut également entraîner la formation de gouttelettes à l'extrémité de la pointe, car la pression de vapeur augmente et le liquide est forcé de sortir de la pointe.

6. Optimiser la gamme de volumes

Les pipettes à déplacement d'air présentent les meilleures performances entre 35 % et 100 % du volume nominal. De plus, le pipetage dans la plage de volume optimale est moins dépendant de la technique et réduit les erreurs de pipetage liées à l'utilisateur.

7. Jeter la première et la dernière distribution

Lors de la distribution de plusieurs aliquotes, il est recommandé de jeter la première et la dernière distribution de la série.

Remarque : ces deux distributions ne doivent pas être utilisées pour le test car elles contiennent les erreurs les plus importantes. Il est particulièrement important de jeter la dernière distribution car elle contient l'erreur accumulée de toutes les distributions précédentes.

8. Pipetage de liquides visqueux

Les échantillons visqueux doivent être aspirés et distribués à des vitesses plus lentes en raison du petit orifice de la pipette et de l'élasticité de la colonne d'air. Comme ils adhèrent également à la paroi intérieure de la pointe, vous devez utiliser le mode "Pipetage inverse" pour compenser le liquide retenu.

Remarque : le mode "Pipetage inversé" aspire le volume sélectionné plus une dose supplémentaire. La dépose supplémentaire est jetée.

9. Pipetage de liquides volatils

Pré-humidifiez les pointes de pipette pour humidifier l'espace d'air mort. Les solutions volatiles doivent être pipetées rapidement et en mode "pipetage inversé". Le mode "pipetage inversé" incorpore un plus grand volume d'échantillon pour minimiser l'effet de l'évaporation sur le volume réel à délivrer.

10. Calibrer en fonction de la densité du liquide

D'importantes erreurs de pipetage peuvent se produire lorsque des liquides autres que des solutions aqueuses sont utilisés. Recalibrez votre pipette si le liquide a une densité considérablement différente de celle de l'eau.

Remarque : Les pipettes sont normalement testées et étalonnées en usine avec de l'eau distillée à température ambiante. Le pipetage de liquides ayant des densités différentes entraîne des distributions inexactes.